第391章 五毫克（1 / 6）
何建邦的两百升罐子跑了六十七个小时。
小周在中试车间守了三天没回宿舍，张浩给他弄了一张行军床塞在控制台后面。甲醇进料速度从最初的3ml/min手动提到了4.5ml/min——do一度掉到15%以下，搅拌转速从200拉到280才拉回来，小周差点以为菌要死了。
幸好没死。
第四天早上，何建邦亲自到车间放罐。
两百升黄浊的发酵液通过连续流离心机分离，湿菌体收了一点七公斤。
小陈接手，高压匀浆破壁，硫酸銨分级沉淀粗提。
sds-page胶上目標条带比小试浓了至少五倍，看得何建邦喉结动了一下。
下午，镍柱亲和层析纯化。
因为用的是全合成培养基没加血清，杂蛋白比预期少，一次过柱纯度就到了85%以上。
何建邦不敢省第二步，又跑了一遍离子交换，纯度升至97%。
bradford法测蛋白浓度，最终收穫的纯化目標蛋白：二十三点四毫克。
这个数字比预估的上限还多了三毫克。
“转化率？”何建邦在电话里问小周。
小周敲了一阵计算器。“hplc测底物消耗后推算，这批的转化率是4.2%，比小试的3.7%高了半个百分点。张浩的罐子控温太好了，酶活这块直接受益。”
4.2%。
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不算高，但对於一个未经任何密码子优化和启动子工程的野生型cyp450来说，已经是拿得出手的数据了。
何建邦把二十三毫克纯品分成三份。
八毫克送核磁——比最低要求多了三毫克，保险。
五毫克留给小陈做细胞毒性试验。
剩下的十毫克冻存在-80度冰箱。
核磁排在周四，还有两天。
罗明宇收到进展后没回消息——他正在急诊手术室里。
---
一个二十八岁的外卖小哥骑电瓶车在红桥路口被右转的混凝土搅拌车剐了后轮，人从车上飞出去滑行了四五米。
左小腿脛骨开放性骨折，骨茬穿出皮肤两厘米，伤口边缘夹著沥青渣和碎塑料壳。
右手手掌被地面磨掉一块皮，面积约4x5厘米，真皮层暴露。
张波已经开始清创了。
左小腿的伤口冲了两遍碘伏两遍盐水，异物挑了十几颗，骨折端用生理盐水持续冲洗。
问题在於骨折端污染比较重——搅拌车轮子碾过路面带起的混凝土粉末和泥沙嵌入了骨断面的髓腔口。 ↑返回顶部↑
小周在中试车间守了三天没回宿舍，张浩给他弄了一张行军床塞在控制台后面。甲醇进料速度从最初的3ml/min手动提到了4.5ml/min——do一度掉到15%以下，搅拌转速从200拉到280才拉回来，小周差点以为菌要死了。
幸好没死。
第四天早上，何建邦亲自到车间放罐。
两百升黄浊的发酵液通过连续流离心机分离，湿菌体收了一点七公斤。
小陈接手，高压匀浆破壁，硫酸銨分级沉淀粗提。
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下午，镍柱亲和层析纯化。
因为用的是全合成培养基没加血清，杂蛋白比预期少，一次过柱纯度就到了85%以上。
何建邦不敢省第二步，又跑了一遍离子交换，纯度升至97%。
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这个数字比预估的上限还多了三毫克。
“转化率？”何建邦在电话里问小周。
小周敲了一阵计算器。“hplc测底物消耗后推算，这批的转化率是4.2%，比小试的3.7%高了半个百分点。张浩的罐子控温太好了，酶活这块直接受益。”
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五毫克留给小陈做细胞毒性试验。
剩下的十毫克冻存在-80度冰箱。
核磁排在周四，还有两天。
罗明宇收到进展后没回消息——他正在急诊手术室里。
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一个二十八岁的外卖小哥骑电瓶车在红桥路口被右转的混凝土搅拌车剐了后轮，人从车上飞出去滑行了四五米。
左小腿脛骨开放性骨折，骨茬穿出皮肤两厘米，伤口边缘夹著沥青渣和碎塑料壳。
右手手掌被地面磨掉一块皮，面积约4x5厘米，真皮层暴露。
张波已经开始清创了。
左小腿的伤口冲了两遍碘伏两遍盐水，异物挑了十几颗，骨折端用生理盐水持续冲洗。
问题在於骨折端污染比较重——搅拌车轮子碾过路面带起的混凝土粉末和泥沙嵌入了骨断面的髓腔口。 ↑返回顶部↑