第201章 35%(感谢牛津面的盟主!)(3 / 5)
“行了,別解释了,想那么多干嘛?这些问题是老大需要考虑的,我们现在的任务是把提取这关过了,別到了最后,老大从欧洲、从挪威、从美国把样本找来了,结果咱们连rna都提不出来,那才叫丟人。
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“靠,也是啊!確实有点想太多了————”
两个人带著水回到实验室。
发现江河已经回来了,正站在nanodrop的屏幕前。
而且王教授正在乖巧地匯报情况:“纯度提不上去,trizoi的局限性,血清里的蛋白含量远超组织,吸取上清液的时候,不可避免地会带入杂质,如果要避免带入杂质,就只能吸取最表层的少量液体,但那样rna的浓度又达不到下游pcr的要求,咋办?”
江河淡然道:“不早跟你们说过了?加糖原。”
实验室里的人都愣了一下。
老组员虽然听过江河讲这个事情,但是大家都不知道具体该怎么执行啊————
“噢,怪我,讲的不够细。”
江河隨后解释道:“在加入异丙醇沉淀之前,往水相里加入5微升浓度为5mg/ml的糖原作为共沉淀剂,不仅能作为载体帮助极微量的rna聚集沉淀,还能让最后形成的沉淀团块变得肉眼可见,方便后续洗涤,减少丟失。”
陆晓林思考了一下,提出了疑问:“可是这解决不了杂质的问题啊,只要我们用移液枪吸水相,还是会吸到蛋白。”
江河回答:“所以,洗两遍,双重氯仿抽提,第一次加氯仿离心后,吸取上清液,移入新的离心管,然后,往吸出的这部分上清液里,再加一次等体积的氯仿,剧烈震盪,进行第二次离心,简单来说,牺牲第一次的取液量来换取纯度,然后再通过加入糖原共沉淀,把浓度拉回来。”
这下大家听懂了。
王晓晴在心里给自己点了个赞。
放弃思考,果然是正確的。
一听江河的就完事了!
一嘖,要是每个项目都能有一个江河就好了,就不用天天在实验室熬掉头髮。
晓晴教授马上就要步杨煦的后尘了。
杨煦也是,自从跟江河合作上了手术台之后,就很想每次上手术台都把江河带上了——
教授们需要严肃反思这种过於依赖江河的行为。
实验在新方案下,再次开始。
高速冷冻离心机,盖上盖子,设定参数:4摄氏度,12000g,15分钟。
离心机运转的时候很吵。
江河隨便找了个凳子坐下,继续往后推演接下来的研究。
刚才他离席出去打了个电话,聊的就是血清的事情。
“放心吧,江河,我会走欧洲高规格的联合医学科研通道,通过跨国乾冰冷链把极早期患者的血清特批空运过来————”
说出这话的顾老师,真是令人安心啊。
实验室里其他人都有些紧张,大家都在等待这15分钟后的结果。
易向晚看著江河的背影,浓浓的安全感瞬间涌上来了。 ↑返回顶部↑
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“靠,也是啊!確实有点想太多了————”
两个人带著水回到实验室。
发现江河已经回来了,正站在nanodrop的屏幕前。
而且王教授正在乖巧地匯报情况:“纯度提不上去,trizoi的局限性,血清里的蛋白含量远超组织,吸取上清液的时候,不可避免地会带入杂质,如果要避免带入杂质,就只能吸取最表层的少量液体,但那样rna的浓度又达不到下游pcr的要求,咋办?”
江河淡然道:“不早跟你们说过了?加糖原。”
实验室里的人都愣了一下。
老组员虽然听过江河讲这个事情,但是大家都不知道具体该怎么执行啊————
“噢,怪我,讲的不够细。”
江河隨后解释道:“在加入异丙醇沉淀之前,往水相里加入5微升浓度为5mg/ml的糖原作为共沉淀剂,不仅能作为载体帮助极微量的rna聚集沉淀,还能让最后形成的沉淀团块变得肉眼可见,方便后续洗涤,减少丟失。”
陆晓林思考了一下,提出了疑问:“可是这解决不了杂质的问题啊,只要我们用移液枪吸水相,还是会吸到蛋白。”
江河回答:“所以,洗两遍,双重氯仿抽提,第一次加氯仿离心后,吸取上清液,移入新的离心管,然后,往吸出的这部分上清液里,再加一次等体积的氯仿,剧烈震盪,进行第二次离心,简单来说,牺牲第一次的取液量来换取纯度,然后再通过加入糖原共沉淀,把浓度拉回来。”
这下大家听懂了。
王晓晴在心里给自己点了个赞。
放弃思考,果然是正確的。
一听江河的就完事了!
一嘖,要是每个项目都能有一个江河就好了,就不用天天在实验室熬掉头髮。
晓晴教授马上就要步杨煦的后尘了。
杨煦也是,自从跟江河合作上了手术台之后,就很想每次上手术台都把江河带上了——
教授们需要严肃反思这种过於依赖江河的行为。
实验在新方案下,再次开始。
高速冷冻离心机,盖上盖子,设定参数:4摄氏度,12000g,15分钟。
离心机运转的时候很吵。
江河隨便找了个凳子坐下,继续往后推演接下来的研究。
刚才他离席出去打了个电话,聊的就是血清的事情。
“放心吧,江河,我会走欧洲高规格的联合医学科研通道,通过跨国乾冰冷链把极早期患者的血清特批空运过来————”
说出这话的顾老师,真是令人安心啊。
实验室里其他人都有些紧张,大家都在等待这15分钟后的结果。
易向晚看著江河的背影,浓浓的安全感瞬间涌上来了。 ↑返回顶部↑